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Citometría de flujo con fluorescencia
La citometría de flujo con fluorescencia se utiliza para analizar las propiedades fisiológicas y químicas de las células. También se puede utilizar para analizar otras partículas biológicas en analizadores de orina. Básicamente proporciona información sobre:
- Tamaño y la estructura de las células
- Interior de las células
La citometría de flujo permite examinar células y partículas que fluyen a través de un flujo laminar.
En primer lugar, se aspira una muestra de sangre y se divide en distintos canales; a continuación, se diluye a un factor preestablecido y se tiñe con un marcador fluorescente patentado que se fija de manera específica sobre los ácidos nucleicos.
La muestra se introduce a continuación en la cámara de flujo y se excita mediante un láser semiconductor, que puede clasificar las células mediante tres señales diferentes:
- Forward scatter (FSC)
- Side scatter (SSC)
- Side fluorescence (SFL)
El Forward Scatter nos indica el volumen de la célula, mientras que el Side Scatter nos ofrece información sobre la complejidad celular como, por ejemplo, sobre el núcleo y los orgánulos. La fluorescencia nos indica la cantidad de ADN y ARN presente en la célula.
Las células con características similares forman un grupo en un gráfico que se denomina diagrama de dispersión.
El principio de la citometría de flujo convfluorescencia se utiliza en diferentes analizadores hematológicos y de orina. Concretamente, en el recuento de células sanguíneas utilizamos la citometría de flujo con fluorescencia, p. ej., para el contaje de leucocitos y eritrocitos nucleados, para la medida de reticulocitos y el recuento diferencial leucocitario (ver todos los valores clínicos).
En los analizadores de orina, la tecnología de fluorescencia se utiliza para contar bacterias, hematíes, leucocitos y otros elementos.
- forward-scattered light (forward scatter or FSC)
- side-scattered light (side scatter or SSC)
- side-fluorescence light (side fluorescence or SFL).